Колос, И. К. Идентификация энзимов гидролиза тиаминмонофосфата в печени кур [] / И. К. Колос, А. Ф. Макарчиков // Укр. біохім. журн. - 2014. - Том 86, N 6. - С. 39-49 Рубрики: ФОСФАТАЗА КИСЛАЯ ФОСФАТАЗА ЩЕЛОЧНАЯ ЛЕВАМИЗОЛ Аннотация: У тварин тіамінмонофосфат (TMP) є інтермедіатом на шляху деградації коензимної форми вітаміну В1 – тіаміндифосфату. Натепер ензими, що беруть участь у метаболізмі TMP в тканинах тварин, не ідентифіковані. Мета роботи полягала в дослідженні гідролізу TMP в печінці курей. В гомогенаті печінки виявлені два ензими з активністю TMPази – розчинний, що виявляє рН-оптимум в кислому середовищі (рН 6,0), і мембранозв’язаний, активність якого максимальна при рН 9,0. Мембранозв’язана фосфатаза активується в 1,7 раза в присутності 5 мМ Mg2+. Уявна Km цього ензиму для TMP, розрахована в координатах Хейнса, становить 0,6 мМ. Левамізол інгібує мембранну TMPазу за безконкурентним шляхом з Ki = 53 мкМ. Активність розчинного ензиму не залежить від іонів Mg2+ і не інгібується левамізолом, уявна Km для TMP дорівнює 0,7 мМ. За даними гель-фільтрації на колонці з тойоперлом HW-55 молекулярна маса розчинної TMPази становить 17,8 кДа, при цьому пік активності TMPази збігається з піками флавінмононуклеотид- і п-нітрофенілфосфатазної активності. Одержані результати вказують на те, що TMP є фізіологічним субстратом низькомолекулярної кислої фосфатази, відомої також як низькомолекулярна протеїн-фосфотирозин-фосфатаза. Гідроліз TMP, який спостерігається в гомогенаті печінки курей за лужних рН, обумовлено дією лужної фосфатази. Доп.точки доступа: Макарчиков, А. Ф. Экз-ры: |