Кріоконсервування пробіотичних штамів мікроорганізмів, іммобілізованих в гелевих гранулах з додатковим покриттям [] / І. В. Петров [та ін.] // Вісн. пробл. біол. і медицини. - 2021. - № 1. - С. 189-192 : діаграма. - Бібліогр. в кінці ст.
MeSH-главная:
МИКРОБИОТА -- MICROBIOTA
ПРОБИОТИКИ -- PROBIOTICS
КРИОПРЕЗЕРВАЦИЯ -- CRYOPRESERVATION
Аннотация: Метою роботи було встановлення впливу додаткового покриття гелевих гранул шаром альгінатного гелю на життєздатність іммобілізованих в гранулах пробіотичних штамів мікроорганізмів після швидкого охолодження до температури -196оС та зберігання за цієї температури. Об’єктами дослідження були бактерії B. bifidum, штам 1, E. coli M-17 та дріжджі S. boulardii CNCM I-745. B. bifidum вирощували у напіврідкому середовищі Блаурока, E. coli М-17 – на скошеному агаризованому середовищі «Nutrient Agar» («Biolife», Італія), S. boulardii – на скошеному сусло-агарі. Після вирощування бактерії E. coli та дріжджі S. boulardii змивали з поверхні агаризованих середовищ фізіологічним розчином. Бактерії B. bifidum відмивали від середовища Блаурока і теж суспендували у фізіологічному розчині. Для гелевих гранул і додаткового шару гелю використовували альгінат натрію Е 401 («FarmaSino», Китай). Мікробні клітини іммобілізували в гелевих гранулах методом іонотропного гелеутворення. Стабілізували гранули у 0,2 М розчині CaCl2 . Були отримані гранули шаровидної форми з діаметром 2,2±0,2 мм. Кінцева концентрація альгінату натрію в гранулах становила 1%. Концентрація клітин в гелі становила 109 клітин/мл. Для нанесення додаткового покриття на окремі гранули та для отримання конгломератів окремі гранули або по 10-ть гранул брали пінцетом і занурювали у 2% розчин альгінату натрію. Гранули з додатковим покриттям та конгломерати також стабілізували у 0,2% розчині CaCl2 . Заморожували зразки гранул та конгломератів зануренням у рідкий азот (-196оС). Життєздатність клітин визначали «чашковим» методом Коха за здатністю клітин до колонієутворення. Встановлено, що під час заморожування до -196о С кількість життєздатних клітин B. bifidum та E. coli, іммобілізованих в гелевих гранулах без додаткового покриття, в гранулах з додатковим покриттям та в конгломератах зменшувалася. При цьому відносна кількість клітин, які загинули, не відрізнялася від показників загинувших клітин в гранулах без додаткового покриття. В експериментах із клітинами дріжджів S. boulardii було показано, що кількість життєздатних клітин в гранулах з додатковим покриттям та в конгломератах після заморожування до -196оС достовірно вища, ніж в гранулах без додаткового покриття. Під час наступного зберігання протягом 3-х місяців (термін спостереження) кількість життєздатних клітин бактерій та дріжджів не змінюється.


Доп.точки доступа:
Петров, І. В.; Ананьїна, Г. Є.; Онасенко, О. С.; Степанюк, Л. В.; Нардід, Е. О.
Экз-ры: