Вид документа : Статья из журнала Шифр издания : Автор(ы) : Терещенко В. П., Булыгин А. С., Заводский Р. Ю., Куликова Е. В., Сенников С. В. Заглавие : Получение дендритных клеток мышей in vitro с помощью Flt3-L и их характеристика Место публикации : Иммунология. - М., 2020. - Т. 41, № 3. - С. 215-226: диаграмма (Шифр ИР10/2020/41/3) Примечания : Библиогр. в конце ст. MeSH-главная: ДЕНДРИТНЫЕ КЛЕТКИ -- DENDRITIC CELLS МЫШИ -- MICE МИЕЛОИДНЫЕ КЛЕТКИ -- MYELOID CELLS Аннотация: В настоящее время для модуляции адаптивного иммунного ответа с целью коррекции тех или иных заболеваний человека активно разрабатываются клеточные вакцины на основе миелоидных дендритных клеток (мДК). Однако об эффективности применения плазмацитоидных дендритных клеток (пДК) в тех же целях все еще мало данных. Цель исследования - разработка протокола получения пДК мышей с помощью рекомбинантного Flt3-L in vitro и описание фенотипических и функциональных свойств полученных дендритных клеток (ДК) для решения вопроса о возможности их использования при создании клеточных вакцин. Материал и методы. ДК получали путем культивирования клеток костного мозга мышей в присутствии Flt3-L. Относительное количество и фенотип ДК оценивали с помощью проточной цитофлуориметрии, а морфологию ДК - с помощью флуоресцентной микроскопии. Функциональные свойства ДК изучали по их способности индуцировать Трег-клетки и пролиферацию CD4+-лимфоцитов в смешанной культуре лимфоцитов. Экспрессию рецептора хемотаксиса ССR9 на ДК оценивали с помощью проточной цитофлуориметрии. Результаты. Показано, что c помощью Flt3-L из клеток костного мозга мышей возможно in vitro получение культур ДК с относительно высоким содержанием B220+CD11c+-пДК и Sirp?+CD11c+-мДК. B220+CD11c+-пДК и Sirp?+CD11c+-мДК в полученных культурах отличались морфологией и степенью зрелости. В смешанной культуре лимфоцитов полученные in vitro ДК, обладали свойствами незрелых ДК, что проявлялось в их способности генерировать повышенное количество Трег и вызывать сниженную пролиферацию CD4+-лимфоцитов. При стимуляции полученных ДК с помощью CpG ДНК наблюдалось их созревание и снижение способности к индукции Трег и увеличение способности к индукции пролиферации CD4+-лимфоцитов, т.е. приобретение иммуногенной функции. Относительно небольшое количество B220+CD11c+-пДК и Sirp?+CD11c+-мДК несли на поверхности рецептор хемотаксиса CCR9, однако количество B220+CD11c+-пДК и Sirp?+CD11c+-мДК, несущих CCR9 внутриклеточно, стремилось к 100 %. Заключение. Таким образом, с помощью Flt3-L из клеток костного мозга мышей возможно in vitro получение культурB220+CD11c+-пДК и Sirp?+CD11c+-мДК, пригодных к применению при разработке клеточных вакцин для подавления нежелательного адаптивного иммунного ответа и для индукции желательного. Доп.точки доступа: Терещенко, В. П.; Булыгин, А. С.; Заводский, Р. Ю.; Куликова, Е. В.; Сенников, С. В.