Пащенков, М. В.     Применение РНК-интерференции для изучения механизмов распознавания мурамилпептидов [] / М. В. Пащенков, Б. В. Пинегин // Иммунология. - 2012. - Том 33, N 6. - С. 292-297. - Библиогр.: с. 296-297 . - ISSN 0206-4952 Рубрики: РНК ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ    МАКРОФАГИ    ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ    ИММУНОФЕРМЕНТНЫЕ МЕТОДЫ    ТРАНСФЕКЦИЯ Дод.точки доступу: Пинегин, Б.В. Экз-ры:

Влияние генной терапии с использованием гена АРОЕ3 на структурные и функциональные проявления вторичных повреждений гиппокампа при черепно-мозговой травме в эксперименте [] / Е. Г. Педаченко [и др.] // Журнал Вопросы нейрохирургии им. Н.Н. Бурденко. - 2015. - Том 79, N 2. - С. 21-32 Рубрики: ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ    ЧЕРЕПНО-МОЗГОВЫЕ ТРАВМЫ    ГЕНОТЕРАПИЯ    CA1 ОБЛАСТЬ ГИППОКАМПА    НЕЙРОНЫ    АПОПТОЗ    ИММУНОГИСТОХИМИЯ    МИКРОСКОПИЯ ЭЛЕКТРОННАЯ    ГЕНА ПЕРЕНОСА МЕТОДЫ    ТРАНСФЕКЦИЯ    ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ВЕКТОРЫ    ПЛАЗМИДЫ    ЛИПОСОМЫ    АПОЛИПОПРОТЕИНЫ E    ДВИЖЕНИЯ РАССТРОЙСТВА    КОГНИТИВНЫЕ РАССТРОЙСТВА    ВОЗРАСТНЫЕ ФАКТОРЫ    ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА ЖИВОТНЫХ    КРЫСЫ ЛИНИИ WISTAR Анотація: Цель — исследовать эффективность генной терапии при черепно-мозговой травме (ЧМТ) путем оценки влияния липосомальной трансфекции ткани головного мозга плазмидным вектором, несущим ген АРОЕЗ человека, на структурные и функциональные проявления развития вторичных повреждений головного мозга в остром периоде экспериментальной ЧМТ у крыс разного возраста. Материал и методы. Тяжелая ЧМТ наносилась крысам под общей анестезией свободным падением груза массой 450 г с высоты 1,5 м. Внутрижелудочковая инфузия катионных липосом DOTAP, несущих 25 мкг плазмидного вектора pCMV•SPORT6 с комплементарной дезоксирибонуклеиновой кислотой гена АРОЕЗ, выполнялась с помощью осмотических помп ALZET. После исследования двигательных функций (по шкале двигательной дисфункции) и когнитивных функций (в водном лабиринте Мориса) на 5-е и 10-е сутки после ЧМТ и генной терапии проводилось комплексное морфологическое, электронно-микроскопическое, иммуногистохимическое и морфометрическое исследование поля СА1 гиппокампа. Результаты. На модели тяжелой ЧМТ у взрослых и старых крыс линии Wistar отмечены существенные изменения морфофункционального состояния гиппокампа, а также неврологических и когнитивных функций. Генная терапия, а именно липосомальная трансфекция клеток центральной нервной системы плазмидным вектором, несущим ген АРОЕЗ человека, положительно влияет на структуру и ультраструктуру гиппокампа — сокращает индуцированную ЧМТ гибель нейронов и улучшает их качественный состав, нормализует нейрон-глиальное взаимодействие, уменьшает глиоз и микроглиальную реакцию, аксональное повреждение, деструкцию миелина и накопление липофусцина, что имеет определенные возрастные особенности. После генной терапии в головном мозге животных наблюдалось уменьшение интенсивности процессов апоптоза (в большей степени присущее взрослым крысам). Все это сопровождается более быстрым и выраженным регрессом неврологических и когнитивных расстройств, характерных для ЧМТ. При введении плазмидного вектора после ЧМТ значительно повышалась выживаемость старых крыс по сравнению с животными того же возраста, не получавшими генной терапии. Выводы. Генная терапия с использованием гена АРОЕЗ обладает терапевтическим потенциалом в лечении тяжелой ЧМТ. Дод.точки доступу: Педаченко, Е.Г.; Белошицкии, В.В.; Михальский, С.А.; Гридина, Н.Я.; Квитницкая-Рыжова, Т.Ю. Экз-ры:

Инструменты геномной инженерии, предназначенные для создания изогенной клеточной модели бокового амиотрофического склероза [] / К. Р. Валетдинова [и др.] // Медицинская генетика. - 2015. - Том 14, N 6. - С. 3-9 MeSH-головна: ГЕНОМ -- GENOME (генетика) ПЛАЗМИДЫ -- PLASMIDS (генетика) ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ -- POLYMERASE CHAIN REACTION (методы) ТРАНСФЕКЦИЯ -- TRANSFECTION (методы) СЕКВЕНИРОВАНИЕ ДНК -- SEQUENCE ANALYSIS, DNA (методы) ДНК -- DNA (диагностическое применение) ГЕНА АМПЛИФИКАЦИЯ -- GENE AMPLIFICATION (генетика) НУКЛЕОТИДНЫЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ, ВЫЗЫВАЮЩИЕ ГЕННЫЙ ОТВЕТ -- RESPONSE ELEMENTS (генетика) ГЕННАЯ ЭКСПРЕССИЯ -- GENE EXPRESSION (генетика) МУТАЦИЯ -- MUTATION (генетика) Анотація: Системы редактирования генома TALEN и CRISPR/Cas9 являются мощными инструментами для решения таких актуальных задач биомедицины, как создание клеточных моделей наследственных заболеваний человека и поиск средств их терапии. В данной работе нами были созданы и оптимизированы инструменты, которые предназначены для получения панели изогенных линий клеток, несущих мутации в гене SOD1, моделирующих наследственную форму бокового амиотрофического склероза (БАС). Для внесения двухцепочечных разрывов в восьми точках нуклеотидной последовательности гена SOD1 было создано 7 пар векторов, которые экспрессируют нуклеазы TALEN, и 8 векторов, экспрессирующих компоненты системы CRISPR/Cas9. Для внесения 11 однонуклеотидных замен, локализующихся вблизи двухцепочечных разрывов, был проведен дизайн донорных молекул - одноцепочечных ДНК-олигонукдеотидов. Показано, что все полученные системы проявляют активность в пределах этого гена, при этом CRISPR/Cas9 имеет более высокую активность по сравнению с TALEN во всех проанализированных точках. Для мутации Ala89Val показано, что использование одноцепочечного олигонуклеотида, модифицированного по концам фосфотиоатными связями, в качестве донорной молекулы повышает частоту гомологичной рекомбинации в месте разрыва. Дод.точки доступу: Валетдинова, К.Р.; Устьянцева, Е.И.; Елисафенко, Е.А.; Жарков, Д.О.; Тупикин, А.Е.; Кабилов, М.Р.; Медведев, С.П.; Закиян, С.М. Экз-ры:

Амінокислотні залишки відповідальні за взаємодію ?1-гліцинових рецепторів із гінкголевою кислотою [] / Г. В. Малєєва [та ін.] // Фізіологічний журнал. - 2016. - Том 62, N 5. - С. 19-26 MeSH-головна: РЕЦЕПТОРЫ ГЛИЦИНА -- RECEPTORS, GLYCINE (действие лекарственных препаратов, физиология) КЛЕТОЧНЫЕ ЛИНИИ -- CELL LINE (действие лекарственных препаратов, физиология) МУТАЦИЯ ТОЧЕЧНАЯ -- POINT MUTATION (действие лекарственных препаратов, физиология) БЕЛКОВОЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ АНАЛИЗ -- SEQUENCE ANALYSIS, PROTEIN (методы) ПЭТЧ-КЛАМП МЕТОДЫ -- PATCH-CLAMP TECHNIQUES (методы) ТРАНСФЕКЦИЯ -- TRANSFECTION (методы) ЭЛЕКТРОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ -- ELECTROPHYSIOLOGICAL PROCESSES Кл.слова (ненормовані): ГИНКГОЛЕВАЯ КИСЛОТА Анотація: Раніше нами було показано, що гінкголева кислота здатна вибірково потенціювати струми, опосередковані ?l-субодиницями гліцинового рецептора. Наступним кроком стало проведення порівняльного аналізу амінокислотних послідовностей ?1- та ?2-субодиниць для встановлення амінокислотних залишків, що можуть бути відповідальні за різницю в дії гінкголевої кислоти на ці рецептори. Із використанням методу patch-clamp у конфігурації «ціла клітина» нами було продемонстровано, що мутація трьох амінокислотних залишків Т59/А261/А303 у ?2-субодиниці, на відповідні їм з ?l-субодиниці, робить ?2-рецептори чутливими до потенціюючого впливу гінкголевої кислоти. Амплітуда струмів, опосередкованих ?2-мутантними рецепторами, після аплікації гінкголевої кислоти збільшувалася на 89±14%. Так само, як і для ?1-рецепторів, для ?2-мутантних рецепторів було характерним зниження напівефективної дози для гліцину під дією гінкголевої кислоти. Таким чином, субодинична вибірковість гінкголевої кислоти пов'язана із трьома амінокислотними залишками, що є відмінними у ?1- та ?2-субодиницях гліцинового рецептора. Дод.точки доступу: Малєєва, Г.В.; Булдакова, С.І.; Скибо, Г.Г.; Брежестовський, П. Д. Экз-ры:

Филатова, Е. Н.     siRNA-опосредованный нокдаун генов в первичных клетках млекопитающих и человека [] / Е. Н. Филатова, Н. Б. Преснякова, О. В. Уткин // Успехи совр. биологии. - 2018. - Том 138, N 6. - С. 549-558 MeSH-головна: ИНТЕРФЕРОНОГЕНЫ -- INTERFERON INDUCERS (диагностическое применение, терапевтическое применение) ТРАНСФЕКЦИЯ -- TRANSFECTION (использование, методы) КУЛЬТУРА КЛЕТОК ПЕРВИЧНАЯ -- PRIMARY CELL CULTURE (использование, классификация, методы) РНК ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ -- RNA INTERFERENCE Анотація: Малые интерферирующие РНК (siRNA) применяют для специфического подавления экспрессии генов в клетках млекопитающих и человека различного происхождения. Перспективным является использование siRNA для терапии некоторых инфекционных заболеваний. На сегодня основным препятствием для применения генного нокдауна в медицинской практике является недостаточная эффективность и безопасность метода в отношении первичных клеток млекопитающих и человека. Изложены современные представления о методах трансфекции siRNA в отношении первичных клеток млекопитающих, об их преимуществах и ограничениях. Приведены результаты собственных исследований возможности липофекции siRNA в первичные иммунокомпетентные клетки крови человека. Описаны основные принципы подбора нуклеотидных последовательностей siRNA, обеспечивающие повышение эффективности и снижение выраженности побочных эффектов генного нокдауна. Дод.точки доступу: Преснякова, Н. Б.; Уткин, О. В. Экз-ры:

Турчина, Н. С.     Вірусна персистенція в атеросклеротичних бляшках пацієнтів з ішемічним інсультом і транзиторною ішемічною атакою після каротидної ендартеректомії [] / Н. С. Турчина, Т. М. Черенько, В. А. Черняк // Український неврологічний журнал. - 2020. - N 1/2. - С. 34-40 MeSH-головна: МОЗГОВОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ РАССТРОЙСТВА -- CEREBROVASCULAR DISORDERS (патофизиология) ИНСУЛЬТ -- STROKE (патофизиология) СОННОЙ АРТЕРИИ ЭНДАРТЕРЭКТОМИЯ -- ENDARTERECTOMY, CAROTID (использование) СОННАЯ АРТЕРИЯ ВНУТРЕННЯЯ -- CAROTID ARTERY, INTERNAL БЛЯШКА АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКАЯ -- PLAQUE, ATHEROSCLEROTIC (вирусология, диагностика, эпидемиология) HERPESVIRIDAE ИНФЕКЦИИ -- HERPESVIRIDAE INFECTIONS (диагностика) ГЕРПЕСВИРУС 6 ЧЕЛОВЕКА -- HERPESVIRUS 6, HUMAN (рост и развитие) ГЕРПЕСВИРУС 1 ЧЕЛОВЕКА -- HERPESVIRUS 1, HUMAN (рост и развитие) ЦИТОМЕГАЛОВИРУС -- CYTOMEGALOVIRUS (рост и развитие) ГЕРПЕСВИРУС 4 ЧЕЛОВЕКА -- HERPESVIRUS 4, HUMAN (рост и развитие) ТРАНСФЕКЦИЯ -- TRANSFECTION (методы) ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ -- POLYMERASE CHAIN REACTION (методы) Анотація: Мета — оцінити частоту виявлення ембологенних та неембологенних атеросклеротичних бляшок, стенозів середнього (50-69 %) і тяжкого ступеня (79—99 %) у пацієнтів з ішемічним інсультом і транзиторною ішемічною атакою з прогресуванням атеросклерозу та наявністю герпетичної інфекції в анамнезі після каротидної ендартеректомії.Матеріали і методи. Обстежено 103 пацієнта після каротидної ендартеректомії, серед них було 67 чоловіків (середній вік — (66,1 ± 1,4) року (42—82 роки)) і 36 жінок (середній вік — (63,0 ± 1,3) року (44—81 рік). Визначали товщину комплексу інтима-медіа, наявність атеросклеротичної бляшки, її консистенцію (гіпоехогенна, ехогенна), структуру, форму, локалізацію, поширення. За допомогою трансфекції та полімеразної ланцюгової реакції в атеросклеротичній бляшці та крові пацієнтів установлювали наявність вірусів HSV1, 2, ЕВV, CMV, HHV6. Результати. У 32 хворих в атеросклеротичній бляшці та крові виявлено переважання CMV та його вірусних асоціацій (CMV/HSV1, CMV/HSV2), у 23 — HHV6 ізольовано та в асоціації (HSV1/HHV6, HHV6/HSV1/HSV2). Висновки. У разі персистенції CMV та асоціації CMV/HSV1 і CMV/HSV2 статистично значущо підвищується ризик розвитку гіпоехогенних ембологенних атеросклеротичних бляшок у внутрішній сонній артерії. У разі персистенції HHV6, асоціації HSV1/HHV6 та HSV1/ 2/HHV6 в атеросклеротичних бляшках у внутрішній сонній артерії статистично значущо підвищується відносний ризик розвитку вираженого стенозу в хворих із симптоматичними стенозами, що є показанням до проведення каротидної ендартеректомії. Отримані результати свідчать про необхідність періодичного проведення ультразвукової допплерографії для заперечення стенозування внутрішньої сонної артерії у хворих на цереброваскулярні захворювання. Дод.точки доступу: Черенько, Т. М.; Черняк, В. А. Экз-ры: